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细胞培养乐鱼设计规划要求

日期:2023-12-06 15:39:00发布人:本站浏览数:243
  细胞培养乐鱼由无菌操作区、孵育区、制备区、储藏区、清洗和消毒灭菌区6部分组成,这些区域的共同特点是房间要宽敞、明亮,地面要便于清洁、防滑,墙壁的质地光滑坚硬,仪器设备布局合理,方便操作,避免交叉干扰,陈设简洁,便于清扫。


 细胞培养乐鱼设计规划


  无菌操作区

  无菌操作区是只限于细胞培养及其他无菌操作的区域,最好能与外界隔离,不能穿行或受其他干扰。在一般环境的空气中,由于存在许多尘埃和杂菌,较易造成污染。

  因此,接种工作要在空气经过灭菌的环境里进行,小规模的无菌环境可利用超净工作台创造,大规模的需建无菌室。

  理想的无菌操作室应划为三部分:

  a) 更衣室―供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。

  b) 缓冲间―位于更衣间与操作间之间,用于准备工作,还有防止污染的作用,以保证操作间的无菌环境,同时可放置恒温培养箱以及必需的小型仪器。

  c) 无菌操作间―无菌操作间则专用于无菌操作、细胞培养,其大小要适当,且其顶部不宜过高以保证紫外线的灭菌效果;墙壁光滑无死角以便清洗和消毒,无菌操作间容积小且为密闭式,一般无菌操作间的空气消毒用紫外线灯,有的乐鱼使用无臭氧紫外线消毒器或电子消毒灭菌器。

  净化工作台:操作简单,安装方便,占用空间小且净化效果很好。一般细菌培养室使用的净化工作台主要有两种:a)侧流式或称垂直式 b)外流式或称水平层流式。

  孵育区

  孵育区也称培养区,本区对无菌的要求虽不比无菌区严格,但仍需清洁无尘,因此也应设置在干扰少而非来往穿行的区域。孵育可在孵箱或可控制温度的温室中进行,后者费用高,一般乐鱼多采用孵箱进行工作。

  制备区

  制备区主要进行培养液及有关培养用的液体等的制备。应设有试剂柜、器械柜、实验台和上水道、电源等,配备的主要仪器设备有水纯化装置、天平、微波炉、pH计、抽气泵、电炉、培养分装器、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶等。

  在有天平、pH计、磁力拌器等设备下完成制备以后,应在无菌操作台进行过滤除菌。液体制备直接关系组织细胞养的成败,因此必须严格无菌操作。

 储藏区

  储藏区主要存放各类冰箱、干燥箱、液氮罐、无菌培养液、培养瓶等,此环境也需要清洁无尘。为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃。

  细胞的冻存过程需要一系列程序降温,一般为4 ℃下存放30min。转放-20 ℃ 1 h,再转入-80—-70℃过夜,之后才可以转移到液氮内(-196℃)。因此储存区必须配备冰箱、低温冰箱、超低温冰箱和液氮罐等设备。

  清洗和消毒灭菌区

  清洁和消毒灭菌区应与其他区域分开,主要进行所有细胞培养器皿的清洗、准备、消毒及三蒸水制备等工作,应备有高压蒸汽灭菌锅、细菌过滤设备、电热干燥箱、消毒柜、排风设备等。

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